Trái Đất đang đối mặt với mối nguy là một con sinh vật có hình dáng giống bạch tuộc có sức mạnh siêu phàm đã phá hủy 70% Mặt Trăng biến Mặt Trăng thành hình Mặt Trăng khuyết mãi mãi. Snh vật đấy tuyên bố rằng sau một năm Trái Đất cũng sẽ bị hắn phá hủy nhưng hắn đã cho nhân loại một cơ hội để thay đổi số phận. Hắn đề nghị được làm thầy giáo của lớp kém nhất trường trung học Kunugigaoka lớp 3-E và sẽ dạy các học sinh ấy không chỉ các môn học bình thường mà còn dạy nghệ thuật ám sát. Chính phủ Nhật Bản đồng ý và đã treo mức giá 10 tỷ yên cho học sinh nào giết được sinh vật này và Lớp Học Ám Sát được bắt đầu. Tuy nhiên nhiệm vụ trên đã sớm trở thành bất khả thi bởi vì sinh vật đấy không chỉ có các khả năng siêu phàm như tốc độ 20 Mach/giờ mà còn là thầy giáo tuyệt vời nhất mà lớp 3-E từng có được.

- Koro-sensei: Là giáo viên chủ nhiệm lớp 3-E của trường Trung học Kunugigaoka. Anh ban đầu được cho là thủ phạm của sự phá hủy Mặt Trăng làm nó biến thành hình lưỡi liềm vĩnh viễn nhưng điều này sau đó đã được tiết lộ là sai do thủ phạm thực sự là một con chuột cấy ghép với các tế bào của anh đã được gửi đến Mặt Trăng như một phần của thử nghiệm. Mặc dù, không có ý định để bị giết nhưng anh đã cho các chính phủ trên toàn thế giới cơ hội giết anh dưới điều kiện anh sẽ trở thành giáo viên chủ nhiệm lớp 3-E cho đến cuối năm và anh sẽ hủy diệt Trái Đất trừ phi sau một năm anh không bị giết. Mặc dù, biết rõ ràng bản thân anh là mục tiêu của các học sinh nhưng một trong những tính cách của anh là anh có thể kết nối với từng học sinh một cách riêng lẻ. Lý do vì sao tất cả học sinh của anh luôn tôn trọng anh dù biết rằng anh sẽ phá hủy hành tinh này trong một năm. Anh có một hình dáng tương đương như bạch tuộc với các xúc tu và màu da của anh thay đổi tùy thuộc vào tâm trạng của anh. Anh có thể di chuyển ở tốc độ tối đa Mach 20 cho phép anh khi khắp thế giới trong một khoảng thời gian ngắn và làm cho anh trở thành một mục tiêu khó khăn để đánh. Anh cũng rất thông minh đến mức anh có thể dạy hầu như mọi chủ đề cho tất cả học sinh của mình. Tuy nhiên, anh có một số điểm yếu chủ yếu là các dao cao su đặc biệt và viên nén BB được thiết kế đặc biệt để chống lại cơ thể. Mặc dù lúc đầu anh tin rằng mình là một người ngoài hành tinh nhưng sau đó anh được tiết lộ rằng anh từng là một sát thủ con người huyền thoại, người là "Thiên Chúa của sự chết chóc" đầu tiên. Sau khi bị người học việc phản bội anh bị bắt và đưa đến một cơ sở nơi chứa một loạt các thí nghiệm đã được thực hiện trên cơ thể anh, chuyển đổi cơ thể anh. Koro-sensei sinh ra trong một khu ổ chuột của một quốc gia trong thế giới thứ 3, nơi anh sớm biết được mình có một tài năng tự nhiên để giết người và thiếu sự đồng cảm. Anh trở thành một sát thủ giết bất cứ ai với giá cả phải chăng, thậm chí cả các nhà lãnh đạo thế giới và những người đứng đầu toàn bộ quân đội. Tuy nhiên, sau khi bị bắt và dùng làm guinea. Anh bắt đầu học cách từ bi và sự đồng cảm từ một bác sĩ thực tập sinh mà anh gần gũi. Quyết định của anh để trở thành một giáo viên liên quan đến lời hứa của mình với người thực tập sinh nghĩ rằng anh đã thích hợp để trở thành một thầy giáo sau đó được tiết lộ là giáo viên cũ của lớp E, Aguri Yukimura, người đã được chọn để làm người quan sát anh trong thí nghiệm được thực hiện trên anh. Theo Koro-sensei, tuổi thọ của anh sẽ chấm dứt vào cuối năm học vào tháng 3 và nếu anh không bị giết trước lúc đó thì toàn bộ hành tinh sẽ cùng với anh chết vì sự phóng thích vật chất chống lại chất nổ trong cơ thể mà đã được tạo ra bởi các thí nghiệm thực hiện trên cơ thể anh. Trong một cuộc đụng độ dữ dội với Kotaro Yanagisawa, nhà khoa học chịu trách nhiệm về tình trạng hiện tại của anh, là người trong học việc cũ của anh, God of Death thứ hai và sử dụng toàn bộ năng lượng của anh để cứu một trong những học sinh bị thương nặng trong cuộc đối đầu. Koro-sensei kiệt sức chia tay học sinh của mình và cuối cùng cho phép họ giết anh. Nagisa cuối cùng cũng giết được anh bằng cách đâm vào tim.

- Nagisa Shiota: Là một trong những học sinh của lớp 3-E, nhân vật chính của anime. Nagisa được xem là một trong những học sinh yếu kém nhất lớp do tầm vóc nhỏ bé và khả năng thể chất tầm thường của cậu và có thể so sánh với một số cô gái trong lớp. Tuy nhiên, cậu thực sự là tài năng nhất lớp để trở thành một sát thủ của tất cả học sinh mà cái gì đó được thừa nhận bởi Koro-sensei và Karasuma. Cậu có thể che giấu cơn khát máu của cậu để thực hiện một cuộc tấn công bất ngờ và có thể làm cho đối thủ của mình lung lay thông qua ham muốn máu của cậu một mình. Nagisa thường ghi lại điểm yếu của Koro-sensei, mà lúc đầu có vẻ như là hành động trẻ con (vì nó không giống như những điểm yếu lớn). Tuy nhiên một trong số nó, cuối cùng cũng được tiết lộ là hữu ích vì các học sinh gần như có thể giết Koro-sensei với một trong những điểm yếu đó. Về phía bên ngoài Nagisa luôn thân thiện, lịch sử với bạn bè và mọi người. Nhưng cậu giấu một phần bóng tối như một sát thủ mà không đáng chú ý trong các lớp học hàng ngày và chỉ được tiết lộ trong thời gian huấn luyện và ám sát. Khi chiến đấu, Nagisa trở thành một sát thủ tàn bạo, người sẽ vứt bỏ mạng sống của cậu nếu nó có thể giết chết mục tiêu. Theo Karasuma bất cứ khi nào Nagisa giải phóng ý định giết người của cậu, nó sẽ trở thành một sát thủ thực sự.

- Kaede Kayano (Akari Yukimura): Là một trong những bạn học và bạn thân của Nagisa, là người luôn bên cạnh cậu. Cô rất thích bánh pudding và một lần đã cố ám sát Koro-sensei với chiếc bánh pudding khổng lồ với lượng chất nổ bên trong. Cô trải qua một sự tự ti nhẹ khi nói đến sự hấp dẫn tình dục, đặc biệt là kích thước ngực của cô vì cô thường bị lúng túng trước những cô gái có bộ ngực to. Kaede là học sinh nhỏ nhất trong lớp 3-E và thậm chí còn thấp hơn Nagisa và Manami. Cô cũng là học sinh đi kèm với tên của Koro-sensei.

- Karma Akabane: Anh là một trong những người bạn thân nhất của Nagisa, được coi là mạnh nhất và thông minh nhất trong số các học sinh lớp 3-E. Anh là người đầu tiên có thể gây thương tích cho Koro-sensei trong cuộc họp đầu tiên của họ. Anh đã bị đình chỉ học trước khi Koro-sensei đến nơi, bởi giáo viên chủ nhiệm lớp học của anh do hành vi nghịch ngợm của anh. Karma là một trong những học sinh có năng khiếu nhất của trường vì anh là người duy nhất có thể so sánh với Gakushu Asano về kết quả và điểm thi, nhưng đã phát triển thái độ nổi loạn do với sự phản bội của giáo viên trước đây của mình. Sau khi anh bị thương nặng do cứu một sinh viên năm thứ ba một học sinh bị bắt nạt từ lớp 3-E. Mặc dù tin rằng anh đã làm đúng nhưng giáo viên của anh tiết lộ rằng ông chỉ đứng về phía anh vì điểm của anh để tăng danh tiếng của ông và không muốn chịu trách nhiệm về những gì đã xảy ra. Karma sau đó đã đánh đập giáo viên một cách tàn nhẫn dẫn đến việc chuyển sang 3-E. Vì  kinh nghiệm này, Karma ban đầu không tin tưởng Koro-sensei, nhưng Karma bắt đầu chấp nhận Koro sau khi nhận ra Koro-sensei không giống như các giáo viên nguy hiểm khác tại trường. Sau trận đấu để quyết định xem họ có nên giết Koro-sensei hay không anh đã tiến đến gần Nagisa hơn và thậm chí bắt đầu giải quyết Koro mà không có tiền tố. Anh cũng là một trong hai người hay trêu chọc Kaede về tình cảm của cô đối với Nagisa cùng với Rio. Sau khi tốt nghiệp, anh quyết định tham gia vào một cuộc kiểm tra của Chính phủ.

++++++++++++++++++++++++++++++++